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產品詳情
單增李斯特氏菌顯色培養基(國標首選 ALOA法)
品名: 單增李斯特菌顯色培養基(ALOA法)
英文: L. mono Differential HiVegTM Agar Base
貨號: MV1540
品牌: HiMedia
添加劑: 需要
用途: 選擇性鑒別分離單核細胞增生李斯特菌
產品詳情

                                                                                                                                              說明書下載

單增李斯特氏菌顯色培養基

L. mono Differential HiVegTM Agar Base


貨號

產品

原裝品名

規格

貨期

儲存

效期

MV1540

單增李斯特氏菌顯色培養基(ALOA法)

L. mono Differential HiVegTM Agar Base

100g(1.3L)

500g(6.9L)

4-6周

2-8°C

詳見產品包裝

FD214-5VL

添加劑1

L. mono Enrichment Supplement I

5管(2.5L)

4-6周

-20°C

詳見產品包裝

FD212-5VL

添加劑2

L. mono Selective Supplement I

5管(2.5L)

4-6周

2-8°C

詳見產品包裝

FD213-5VL

添加劑3

L. mono Selective Supplement II

5管(2.5L)

4-6周

2-8°C

詳見產品包裝


應用

用于選擇性分離鑒別單核細胞增生李斯特氏菌。


背景

單核細胞增生李斯特氏菌是一種革蘭氏陽性食源性人類病原體,使孕婦嚴重感染并最終可能導致流產、死胎、新生兒李斯特氏菌病和腦膜炎或成人和青少年原發性菌血癥。伊氏李斯特氏菌對人類的致病性不確定(1)。由于單核細胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性,傳統培養基(PALCAM培養基)不能區分。


原理

Ottoviani 和 Agosti (1,2)最先開發了單核細胞增生李斯特氏菌鑒別基礎培養基,用于從食物和動物飼料中選擇性分離鑒別單核細胞增生李斯特氏菌。這款李斯特氏菌顯色培養基在該培養基配方上略作改良。它在制備時用無瘋牛病風險的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨。


該培養基中的HiVeg蛋白胨1號、HiVeg水解物、酵母粉和丙酮酸鈉提供了細菌生長所必需的營養和氮源物質。葡萄糖是可發酵的碳水化合物。氯化鈉維持滲透壓平衡。磷酸鹽是緩沖液成分。氯化鋰和選擇性添加劑(FD212和FD213)抑制伴隨的菌群生長,而允許李斯特氏菌生長。李斯特氏菌水解顯色底物,產生綠色菌落。從其它李斯特氏菌中鑒別出單核細胞增生李斯特氏菌,是依據其特有的磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C (PIPLC)活性。磷脂酶C水解培養基中的底物添加劑(貨號FD214)導致單核細胞增生李斯特氏菌菌落周圍產生不透明的暈環。


培養基組分


成份

克/升

HiVeg蛋白胨1號

18.000

HiVeg水解物

6.000

酵母粉

10,000

丙酮酸鈉

2.000

葡萄糖

2.000

甘油磷酸鎂

1.000

硫酸鎂

0.500

氯化鈉

5.000

氯化鋰

10.000

無水磷酸氫二鈉

2.500

顯色底物

0.050

瓊脂

15.000

  最終pH(25℃)7.2±0.2


配制

36.02g干粉溶于 460ml蒸餾水。加熱沸騰使干粉完全溶解。15磅(121℃)滅菌15分鐘。取李斯特氏菌增菌添加劑(貨號FD214)1管放置室溫融化。取李斯特氏菌選擇性添加劑I(貨號FD212)1管,添加10ml無菌蒸餾水復溶。取李斯特氏菌選擇性添加劑II(貨號FD213)1管,添加2ml 0.2N氫氧化鈉,再加3ml無菌蒸餾水復溶。待460ml培養基冷卻至45-50°C,無菌加入以上復溶的3種添加劑。混勻并傾注于無菌平皿中。


警告:氯化鋰是有害的。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸,應用大量水沖洗。


質量控制

外觀:奶油色至黃色均一自由流動粉末。

成膠性:牢固,與1.5%瓊脂凝膠相當。

成品顏色和透明度:淡琥珀色,不透明凝膠。

配比反應:25℃時7.2%(7.2g/100ml蒸餾水)水溶液,pH: 7.2±0.2

pH值:7.00-7.40


培養反應

培養基無菌加入3種添加劑(FD212,FD213,FD214)制備好后,接種下列菌種,35-37℃孵育24-48小時后觀察培養反應。




有機體

接種(CFU)

生長

回收率

菌落顏色

PIPLC活性

白色念珠菌(ATCC 10231)

≥103

抑制

0%



糞腸球菌(ATCC 29212)

≥103

抑制

0%



大腸埃希氏菌(ATCC

25922)

≥103

抑制

0%



英諾克李斯特氏菌(ATCC 33090)

≥103

旺盛

≥50%

藍綠色

(-)

格雷氏李斯特氏菌(ATCC 19120)

50-100

旺盛

≥50%

藍綠色

(-)

伊氏李斯特菌(ATCC 19119)

50-100

旺盛

≥50%

藍綠色

(+)菌落周圍有不透明暈環

單核細胞增生李斯特氏菌(ATCC 19112)

50-100

旺盛

≥50%

藍綠色

(+)菌落周圍有不透明暈環

斯氏李斯特氏菌(ATCC

35967)

50-100

旺盛

≥50%

藍綠色

(-)

威爾斯李斯特氏菌(ATCC

43549)

50-100

旺盛

≥50%

藍綠色

(-)

銅綠假單胞菌(ATCC 27853)

≥103

抑制

0%






參考文獻

1.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.

2.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p. 6, A.D.R.I.A. Quimper,France, 16-18 June 1997.


產品引用文獻

1. H Momtaz,S Yadollahi. Molecular characterization of Listeria monocytogenes isolated from fresh seafood samples in Iran.Diagnostic Pathology, 2013,8(1):1-6
2. MM Yadav,A Roy,B Bhanderi,C Joshi.Pheno-genotypic characterization of Listeria monocytogenes from bovine clinical mastitis.Buffalo Bulletin,2010 , 29(1):29-38
3. Nitin Chandhrakant Dudhe,et al. InVitro Characterization of Listeria monocytogenes Isolates by Haemolysis, Camp, Piplc Assay with Protein Profiling and Antibiotic Resistance Recovered from Nagpur Region.Advances in Animal and Veterinary Sciences.2014,2(6): 321–328
4. Shole Yadollahi, Hassan Momtaz,Monir Doudi,Elahe Taj bakhsh. The objective of this study was to isolation and characterization of Listeria species and determines Listeria monocytogenes serotypes in fresh fish,shrimp, crab and lobster in Isfahan and Shahrekord, Iran.International journal of Advanced Biological and Biomedical Research.2013,1(5):493-504
5. Sanjita Sharma, Vishnu Sharma, Dinesh Kumar Dahiya, Aarif Khan, Manisha Mathur, Amit Sharma.Prevalence, Virulence Potential, and Antibiotic Susceptibility Profile of Listeria monocytogenes Isolated From Bovine Raw Milk Samples Obtained From Rajasthan, India.Foodborne Pathogens & Disease, 2017,14(3):132